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诱导动物细胞融合的方法
点击次数:6397 公布日期:2009-1-6  来源:本站 仅供参考,谢绝转载,否则责任自负
 
在体外培养条件下,动物细胞会自发融合,但是频率极低。因此,一般都需要添加具有诱导细胞融合效应的生物或化学药剂,或者采纳电融合技术,人为地促进细胞融合。
 
病毒诱导融合 
 
病毒是最早采纳的融合剂。常用于诱导动物细胞融合的病毒有仙台病毒、新城鸡瘟病毒、疱疹病毒等,其中仙台病毒最常用。用作融合剂的病毒必须事先用紫外线或β-丙内酯灭活,使病毒的感染活性损失而保留病毒的融合活性。
用灭活的仙台病毒诱导细胞融合的
优点:融合率较高,对各种动物细胞都适宜,且仙台病毒能在鸡胚中大批生殖,容易培养;
缺点:仙台病毒不稳定,在保留进程中融合活性会降低,并且制备进程比较烦琐。此外,病毒引进细胞后,可能会对细胞的生命运动发生干扰
 
聚乙二醇PEG诱导融合 
 
聚乙二醇PEG具有强烈的吸水性以及凝聚和沉淀蛋白质的作用,能够有效地促进植物原生质体和动物细胞的融合。在差别种类的动物细胞混合液中加入聚乙二醇,就会发生细胞凝集作用;在稀释和除去聚乙二醇的进程中,就会发生细胞融合。聚乙二醇诱导细胞融合的机理,当前还不太清楚。聚乙二醇是化学试剂,使用起来很方便,诱导细胞融合的频率比较高,但是它有肯定毒性,对有些细胞(如卵细胞)不适用
 
细胞融合法 
20世纪80年代树立起来的细胞融合技术,是将两种细胞的混合液置于低压交流电场中,使细胞聚集成串珠状,然后施加高压电脉冲,以促使细胞融合。紧密排列的细胞,在相互接触的细胞膜之间会出现无蛋白颗粒的脂质区,当受到电击时,这个地区就会被击穿,发生脂双层膜孔,导致细胞之间的细胞质连通,进而发生细胞融合。细胞融合技术有许多优点,如导细胞融合的频率高,对细胞无伤害作用,操作简便,可反复性好。
来源:香港友诚生物科技有限公司
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