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赛默飞离心小课堂 |如何使用超速离心法纯化外泌体
点击次数:8186 公布日期:2018-4-21  来源:赛默飞

细胞作为我们生命最小的单位,我们有宏观的沟通,他们自然也有微观的沟通。而这细胞的“语言”,就是外泌体系统。

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外泌体系统的意义

简单的来说,细胞通过离别自己的一局部膜,把自己“情话”(核酸,蛋白等)包裹成外泌体释放出去,最后融入到别的细胞里进行沟通。对付我们人类来说,破解了外泌体系统等于破解了细胞沟通的暗码,对付我们生命科学开展意义非凡。

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用超速离心法纯化外泌体

研究外泌体的第一步,那肯定是得先把这些小家伙给抓住。虽外泌体离别市场上百花齐放。 但这些离别技术都在纯度上不尽人意。得到最纯的外泌体,揭开他们背后的故事,超速离心技术是最好的选择。

那么,

如何选择适合的离心机

进行外泌体离心离别?

赛默飞世尔是科学服务领域的世界领袖者,旗下离心机产品一直以安定可靠与无微不至的便捷性著称。

▶Thermo Scientific Sorvall WX+系列超速离心机

卓越的离心性能:最大离心力达802,000 xg,满足外泌体纯化实验需要

多样的转头选择可离心从1.5 mL离心管到250 mL离心瓶的各式离心容器,满足您实验室离心各种应用的需要,尽显无以伦比的便捷性。

·Auto-Lock转头自锁,3秒即可更换转头实现一机多用;Auto-ID瞬时转头主动识别

·第三方认证Clickseal生物安定性密封技术,防止气溶胶发生,保护实验人员的安定

·永不疲惫的Fiberlite转头,重量轻,硬度大,耐腐蚀,提供15年质保,终生无需减速使用

 
 

近日,麻省综合医院(MGH)的研究人员开拓的一款新型微流体装置。 该装置能够使用微流控技术快速检测血液中癌症细胞来源的外泌体,以此作为癌症诊断手段。

通讯作者Shannon Stott教授说,他们的设施能够从在血液中数十亿细胞外囊泡中挑选出肿瘤特异的细胞外囊泡。这将为未来癌症诊断及监控提供新的方法。[1]

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由此看来,外泌体的应用可谓是越来越普遍了。这一技术也相符了当今精准医疗的热点“液体活检”思想, 应用前景可谓十分的光明。关于液体活检,它另一个简单粗暴的名字叫“滴血验癌”。想了解“液体活检”的看官能够继续关切我们的微信公众号。我们往后会有详细叙述。

 

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那么,超速离心技术在外泌体研究中到底是如何运用的呢?

用超速离心法纯化外泌体

参考实验流程

1.首先取细胞培养液上清或体液作为样本,低速离心300 xg,10 min,离别出细胞;留上清 2000 x g离心,10 min,去除死细胞。

2.剩下上清继续提高离心力到10000 xg,30 min,去除细胞碎片,处置好后的上清可准备进行超速离心程序。以100,000 xg的离心力,离心70 min,得到粗制外泌体沉淀(含有少量杂蛋白)。

3.用PBS重悬外泌体沉淀,再次100,000 xg,离心70 min,即可得到纯净的外泌体。[2]

如何选择适合的离心机进行外泌体离心离别?

▶Thermo Scientific™ Sorvall™ WX+ 系列超速离心机

卓越的离心性能:最大离心力达802,000 xg,满足外泌体纯化实验需要

多样的转头选择,可离心从1.5 mL离心管到250 mL离心瓶的各式离心容器,满足您实验室离心各种应用的需要,尽显无以伦比的便捷性

Auto-Lock™ III 转头自锁系统,3秒即可更换转头实现一机多用;Auto-ID瞬时转头主动识别

第三方认证ClickSeal™生物安定性密封技术, 防止气溶胶发生保护实验人员的安定

永不疲惫的Fiberlite™转头,重量轻,硬度大,耐腐蚀,提供15年质保,终生无需减速使用

推举配置方案:

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*此方案仅供参考,并未涵盖一切转头、吊篮、适配器及离心管。 如有需要详细配置方案,请联系当地销售。

文章来源:

[1] Engineered nanointerfaces for microfluidic isolation and molecular profiling of tumor-specific extracellular vesicles. Nat. Commun. 2018,9(1):175.

[2] Théry, Clotilde, et al. “Isolation and Characterization of Exosomes from Cell Culture Supernatants and Biological Fluids.” Current Protocols in Cell Biology, 2006, doi:10.1002/0471143030.cb0322s30.

来源:赛默飞世尔科技()有限公司
联系电话:021-61621892
E-mail:lifeismf@qq.com

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